一、技術性能 電導率測量范圍: (0~199.9)μs/cm ;(200~1999)μs/cm ;(2.00~19.99)ms/cm ;(20.0~199.9)ms/cm ; 分辨率: 0.1/1μs/cm ;0.01/0.1ms/cm ; 準確度:電計:±1.0%FS;配套:±1.5%FS 溫度補償:10-50℃手動補償, 基本配置:DJS-1E(鉑黑)電極; 1408μs/cm 電導率標準校準座; 7號DC1.5V電池4節 1.工作條件 環境溫度: 0~40℃ 相對濕度: <85% 供電電源:7號DC1.5V電池4節 無顯著的振動 除地磁場外無其他磁場干擾。 可選配電極規格常數: 0.1、1、10 外形尺寸及重量: 180×80×30mm(長×寬×高) 0.5 kg 二、儀器工作原理 在電解質溶液中,帶電離子在電場作用下產生移動而傳遞電流。其導電能力以電導度G來表示,其值為電阻的倒數。 即 G=1/R 測試電導度大小的方法,可用兩個金屬極板組成的電極插入溶液中,形成一個電導池,測出兩極板間的電阻。根據歐姆定律,該電阻值與極板之間的距離L(cm)成正比,與極板的面積A(cm2)成反比。 即 R=ρ•L/A ρ為電阻率 ,令其倒數為電導率并以K表示,則K=1/ρ 對于某一支電極而言,電極極板之間的有效距離L與極板的面積A之比稱為這支電極的電極常數,用J表示, 即J=L/A 根據以上各式可得: G=K/J 即K=G•J 電導G的單位為西門子,單位符號是S。 1S=103ms=106μS 電導率K的常用單位為mS/cm及μS/cm。 本儀器測試電導的方法,是通過由振蕩器產生的直流電壓加在電極上(加交流電壓的目的是為了避免引起電極的極化),電導池內產生電流,此電流與被測溶液的電導率成正比,經電流-電壓變換、放大、檢波,變換為直流電壓,通過溫度補償等,后經A/D轉換器轉換成數字信號,通過微電腦顯示。整個過程均由微電腦控制和處理。 三、儀器基本說明 1.儀器操作按鍵說明 儀器共有6個操作鍵 1.“開關”—開關鍵,按鍵開關電源。 2.“校準”—校準鍵,在測量狀態時,按鍵進入儀器校準模式。 3.“功能”—功能鍵,按鍵進入參數設置模式P1,P2,P3… 4.“∧、∨”—增加鍵和減少鍵。 a、在測量狀態下,手動溫度補償時按鍵增加或減少溫度值,短按一次改變0.1℃,長按時溫度快速改變。b、在參數設置狀態時,按鍵改變數字。 5.“確認”—確認鍵,在校準狀態或參數設置狀態時按鍵表示確認,按鍵后儀器進入測量狀態。 四、電導率儀常規使用 1.電導率較準 按“校準”鍵,“CAL”閃爍,提示進入校準模式,將1408μs/cm標準標定頭插入儀器后部電極座,等測量值穩定,再按“校準”鍵,LCD顯示閃爍“1408μs/cm” ,幾秒鐘后顯示“End”符號并返回測量模式,可重復校準直至測量值穩定和準確。 注意:儀器出廠時已進行校準,一般情況下可直接使用。 2.電導率測量 根據所測溶液選用適當的電極,把電極插頭插入插座,使插頭的凹槽對準插座的凸槽,按一下插頭的頂部,聽見“咔”的一聲即可。(插頭拔出:捏住插頭往外拔即可)。打開儀器后面的電池蓋,裝上1.5V的電池4節(注意正負級),按“開機”鍵,接通電源,預5分鐘。 將電導電極洗凈并甩干,放入溶液中,攪動后靜止放置,等測量值穩定,即為該溶液的電導率值。 3.重要說明 本儀器內存以下二種校準溶液系列,請在參數設置P1中設定; USA(歐美系列)—84μs/cm ;1413μs/cm ;12.88ms/cm ;111.9ms/cm CH(中國系列)—146.6US/CM;1408μs/cm ;12.85ms/cm ;111.3ms/cm 本儀器具備獨特的一點校準功能,可按水樣和校準溶液的電導率盡量接近的原則選擇一種校準溶液進行校準,一般常用的校準溶液是1408μs/cm ,使用本儀器配套的電導電極(K=1cm-1),用1408μs/cm校準溶液進行校準,可以在小于100ms/cm的測量范圍內使用。請參考表 (1-1)進行選擇。
表(1-1)
測量范圍 | 0.1~20μs/cm | 0.5μs/cm ~ 200ms/cm | ||
電極常數 | K=0.1cm-1 | K=1.0 cm | ||
校準溶液 | 146.6μs/cm | 146.6μs/cm | 1408μs/cm | 12.85μs/cm 111.3Ms/cm |
儀器設置的電導電極校準方法有標準溶液校準法,標準校準座1408μs/cm和常數設定法三種,標準溶液校準法,只要標準溶液是準確的,它就能保證準確度。用戶如習慣采用常數設定法,即根據電導電極上標注的常數值進行設定的方法,試樣座校準法是我公司的創新發明,使用時非常方便快捷(推薦使用),三種校準方法可以任意選用,不會相互影響。儀器出廠設置的溫度補償系數是2.0%/℃,但是各種不同種類和不同濃度溶液的電導率溫度系數各不相同,用戶可參考表(1-2)以及在實驗中得到的數據,在參數設置P3中進行設定。注意:當將溫度補償系數設置為0.00時,即儀器測試時無溫度補償,儀器的測量值是當時溫度下的電導率值.表(1-2)
溶液 | 溫度補償系數 |
NaCl鹽溶液 | 2.12%/℃ |
5%NaOH | 1.72%/℃ |
稀氨水溶液 | 1.88%/℃ |
10%鹽酸溶液 | 1.32%/℃ |
5%硫酸溶液 | 0.96%/℃ |
儀器的其它參數設置內容,請參見表(1-3)4.參數設置電導率測試參數設置一覽表(1-3)表(1-3)
提示符 | 參數設置項目 | 參數 |
P1 | 標準溶液系列選擇 | USA(歐美系列)—84μs/cm ;1413μs/cm ;12.88ms/cm ;111.9ms/cm CH(中國系列)—146.6US/CM;1408μs/cm ;12.85ms/cm ;111.3ms/cm |
P2 | 電極常數選擇 | 0.1,1,10 |
P3 | 溫度補償系數設置 | 0.00~9.99% |
P4 | 電極常數設定 | |
P5 | 溫度單位選擇 | ℃和0F |
P6 | 恢復出廠設置 | OFF---On (關閉—設置) |
(1)電導率校準溶液系列選擇(P1)1.按“功能”鍵,儀器進入P1模式;2.按“∧”或“∨”鍵選擇標準溶液系列;CH-中國系列 USA-歐美系列3.按“功能”鍵進入下一項參數設置或按“確認”并返回測量模式;(2)電極常數選擇(P2)1.在P模式下按“功能鍵”進入P2模式;2.按“∧”或“∨”鍵改變常數設置:0.1→1→10;3.按“功能”鍵進入下一項參數設置或按“確認”鍵確認并返回測量模式;4.P2的出廠設置為K=1;(3)溫度補償系數設置(P3)1.在P2模式下按“功能”鍵進入P3模式;2.按“∧”或“∨”鍵數字改變范圍:0.00-9.99;長按“∧“或“∨”鍵,可快速改變;注意:當設定數字為0.00時,表示沒有溫度補償;3.按“功能”鍵進入下一項參數設置或按“確認”鍵確認并返回測量模式;P3的出廠設置是2.0%;(4)電極常數設定(P4)1.在P3模式下按“功能”鍵進入P4模式,LCD顯示前一次校準的常數值;2.按“∧”或“∨”鍵修改大小,根據電導電極上標記的常數值進行設定;3.按“功能”鍵進入下一項參數設置或按“確認”鍵確認并返回測量模式;4.如需對常數1以外的電導電極進行常數設定,例如使用常數10.3的電導電極,應先進入常數設置P2中設定常“10”,然后再進入P4模式將常數值設定為10.3;(5)溫度單位選擇(P5)1.在P4模式下按“功能”鍵進入P5模式;2.按“∧”或“∨”鍵可選擇溫度單位℃或0F;3.按“功能”鍵進入下一項參數設置或按“確認”鍵確認并返回測量模式;(6)恢復出廠設置(P6)1.在P5模式下按“功能”鍵,進入P6模式;2.按“∧”或“∨”鍵選擇“On”,表示恢復出廠設置模式,2S后返回測量模式;五、注意事項1.儀器出廠時已對電導電極進行校準,一般情況下用戶可直接使用。2.正常使用情況下推薦每月校準一次;新購的電導電極,以及使用一段時間后的電導電極應進行校準。3.保持電導電極的清潔,測量前后要用純水沖洗電極并甩干,好再用被測溶液沖洗電極。4.電導電極的感應棒表面鍍有一層金屬鉑黑,用以降低電極極化,擴大量程,因此鉑黑電極表面不能擦拭,只能在水中晃動清洗,以免損壞鉑黑鍍層;用含有洗滌劑的溫水可以清洗電極上有機成分沾污,也可以用酒精清洗。5.電導電極平時應浸在純水中,以防止鉑黑的惰化,如發現鍍鉑黑的電極失靈,可浸入10%硝酸溶液或10%鹽酸溶液中2min,然后用純水沖洗干凈再測量,如情況并無改善,則鉑黑要重新電鍍,或更換新的電導電極。6.當儀器出現不正常時,請設置P6為“On”,使儀器恢復出廠設置狀態,再進行校準和測試。六、儀器成套 1.便攜式微機型電導率儀主機 1臺2.DJS-1E(鉑黑)電極 1支3.1408μs/cm 電導率標準校準座 1支4.7號DC1.5V電池 4節5.使用手冊 1本6.產品保修卡 1份
上海明想電子科技有限公司特價供應歐姆龍 reliance系列產品聯系人:王小姐OMRON特價現貨C200H-OD21A 現貨CS1W-SCB41現貨C200H-1A222現貨C200H-AD003現貨CS1G-CPU43-V1現貨S82V-0524現貨C200H-OD218現貨CS1W-SCU21現貨E3M-VG11E3M-VG12 2ME3M-VG16E3M-VG17 2ME3M-VG21E3M-VG22 2ME3M-VG26E3R-5DE4 2M BY OMCE3R-5E4 5M BY OMCE3R-DS30E4 2M BY OMCE3R-DS30E4 5ME3R-R2E4 2M BY OMCE3R-R2E4 5ME3R-R2E4. 2ME3S-2B4 2ME3S-2B4 5ME3S-2B41 2ME3S-2DE41 2ME3S-2E4 2ME3S-2E4 5ME3S-2E41 10ME3S-2E41 2ME3S-2LE41 2ME3S-5B4 2ME3S-5B4 5ME3S-5B41 2ME3S-5B41 5ME3S-5B41-T 5ME3S-5B4-T 5ME3S-5C4 2ME3S-5DB4 2ME3S-5DB4 5ME3S-5DB41 2ME3S-5DB41 5ME3S-5DB41-T 5ME3S-5DE4 2ME3S-5DE4 5ME3S-5DE41 2ME3S-5DE43-1 2ME3S-5DE4-T 5ME3S-5E4 2ME3S-5E4 5ME3S-5E41 2ME3S-5E41 5ME3S-5E41-1 2ME3S-5E42 2ME3S-5E43 2ME3S-5E44 2ME3S-5E4S 2ME3S-5LB4 2ME3S-5LB41 2ME3S-5LB41 5ME3S-5LE41 2ME3S-5LE41-1 2ME3S-5LE43 2ME3S-5LE4-T 5ME3S-AD11 2ME3S-AD12 2ME3S-AD12 5ME3S-AD13 2ME3S-AD14 2ME3S-AD17E3S-AD18E3S-AD21 2ME3S-AD21 5ME3S-AD22 2ME3S-AD22 5ME3S-AD31 2ME3S-AD32 2ME3S-AD32 5ME3S-AD33 2ME3S-AD36E3S-AD37E3S-AD38E3S-AD41 2ME3S-AD42 2ME3S-AD61 2ME3S-AD62 2ME3S-AD62 5ME3S-AD63 2ME3S-AD64 2ME3S-AD67E3S-AD68E3S-AD71 2ME3S-AD71 5ME3S-AD72 2ME3S-AD81 2ME3S-AD82 2ME3S-AD82 5ME3S-AD83 2ME3S-AD86E3S-AD87E3S-AD88E3S-AD91 2ME3S-AD92 2ME3S-AD92 5ME3S-AD93 2ME3SA-DS50C43A 2ME3S-AR11 2ME3S-AR11 5ME3S-AR16E3S-AR21 2ME3S-AR21 5ME3S-AR31 2ME3S-AR31 5ME3S-AR36E3S-AR41 2ME3S-AR61 2ME3S-AR61 5ME3S-AR66E3S-AR71 2ME3S-AR71 5ME3S-AR81 2ME3S-AR81 5ME3S-AR86E3S-AR91 2ME3S-AR91 5ME3SA-RS50C43A 2ME3S-AT11 2ME3S-AT11-D 2ME3S-AT11-L-M1J 0.3ME3S-AT11-M1J 0.3ME3S-AT11-M1J-1 0.3ME3S-AT16-LE3S-AT21 2ME3S-AT21 5ME3S-AT21-L 2ME3S-AT21-M1J 0.3ME3S-AT21-M1J-C1 0.3ME3S-AT31 2ME3S-AT31-L 2ME3S-AT31-M1J 0.3ME3S-AT36-LE3S-AT41 2ME3S-AT41-L 2ME3S-AT61 10ME3S-AT61 2ME3S-AT61-L 2ME3S-AT61-M1J 0.3ME3S-AT66-LE3S-AT71 2ME3S-AT71 5ME3S-AT71-L 2ME3S-AT71-M1J 0.3ME3S-AT81 2ME3S-AT81-L 2ME3S-AT81-M1J 0.5ME3S-AT86-DE3S-AT91 2ME3S-AT91-D 2ME3S-BD11 2ME3S-BD11 5ME3S-BD31 2ME3S-BD61 2ME3S-BD61 5ME3S-BD81 2ME3S-BD81 5ME3S-BR11 2ME3S-BR11 5ME3S-BR31 2ME3S-BR61 2ME3S-BR61 5ME3S-BR81 2ME3S-BT11 2ME3S-BT11-L 2ME3S-BT31 2ME3S-BT31-L 2ME3S-BT61 2ME3S-BT61-L 2ME3S-BT81 2ME3S-BT81-L 2ME3S-CD11 2ME3S-CD11 5ME3S-CD11-M1J 0.3ME3S-CD12 2ME3S-CD12 5ME3S-CD12-M1J 0.3ME3S-CD16E3S-CD17E3S-CD61 2ME3S-CD61 5ME3S-CD61-M1J 0.3ME3S-CD62 2ME3S-CD62-M1J 0.3ME3S-CD63 2ME3S-CD66E3S-CD67E3S-CD68E3S-CL1 2ME3S-CL1 5ME3S-CL2 2ME3S-CL2 5ME3S-CR11 2ME3S-CR11 5ME3S-CR11-M1J 0.3ME3S-CR16E3S-CR61 2ME3S-CR61 5ME3S-CR61-M1J 0.3ME3S-CR62 2ME3S-CR62-C 2ME3S-CR66E3S-CR67E3S-CR67-CE3S-CT11 10ME3S-CT11 2ME3S-CT11 5ME3S-CT11-D 2ME3S-CT11-L 5ME3S-CT11-M1J 0.3ME3S-CT16E3S-CT16-DE3S-CT16-LE3S-CT61 2ME3S-CT61 5ME3S-CT61-D 2ME3S-CT61-L 5ME3S-CT61-L-5 5ME3S-CT61-M1J 0.3ME3S-CT66E3S-CT66-DE3S-CT66-LE3S-DS10B4 2ME3S-DS10B4 5ME3S-DS10B41 2ME3S-DS10C4 2ME3S-DS10E4 2ME3S-DS10E4 5ME3S-DS10E41 2ME3S-DS10E41 5ME3S-DS30B4 2ME3S-DS30B4 5ME3S-DS30B41 2ME3S-DS30B41 5ME3S-DS30B42 2ME3S-DS30B4-T 5ME3S-DS30E4 2ME3S-DS30E4 5ME3S-DS30E41 2ME3S-DS30E41 5ME3S-DS30E42 2ME3S-DS30E42 5ME3S-DS30E43 2ME3S-DS30E4S 2ME3S-GS1B4 2ME3S-GS1E4 2ME3S-GS1E4 5ME3S-GS1GE4A 2ME3S-GS1GE4A-30E3S-GS1RB4A 2ME3S-GS1RE4A 2ME3S-GS3B4 5ME3S-GS3E4 5ME3S-GS3E4-1 2ME3S-GS3E4-54-M1J 0.3ME3S-GS3E4-M1J 0.2ME3S-LS10XB4 2ME3S-LS10XB4 5ME3S-LS10XB45 2ME3S-LS10XE4 2ME3S-LS10XE4 5ME3S-LS20XB4 2ME3S-LS20XB4 5ME3S-LS20XE4 2ME3S-LS20XE4 5ME3S-LS3C1D 2ME3S-LS3NW 0.5ME3S-LS3NW 2ME3S-LS3PWT-M5J 0.3ME3S-LS3RC4 2ME3S-R11 2ME3S-R12 2ME3S-R16E3S-R17E3S-R1B4 2ME3S-R1B42 2ME3S-R1B42-P1E3S-R1C4 2ME3S-R1C4 5ME3S-R1C42 2ME3S-R1C42 5ME3S-R1E4 2ME3S-R1E4 5ME3S-R1E42 2ME3S-R1E42 5ME3S-R2B4 2ME3S-R2B41 2ME3S-R2E4 2ME3S-R2E4 5ME3S-R2E41 2ME3S-R2E41 5ME3S-R2E42 2ME3S-R2E43 2ME3S-R2E44 2ME3S-R31 2ME3S-R32 2ME3S-R36E3S-R37E3S-R61 2ME3S-R62 2ME3S-R66E3S-R67E3S-R81 2ME3S-R82 2ME3S-R86E3S-R87
大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)elisa試劑盒 參數:
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規格 |
F4060-A | 大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)elisa試劑盒 | Rat anti-double stranded DNA,dsDNA elisa KIT | 48T |
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規格 |
F4060-A | 大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)elisa試劑盒 | Rat anti-double stranded DNA,dsDNA elisa KIT | 48T |
大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)elisa試劑盒 廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中,我們來介紹一下更簡便的操作說明,編號:F4060-A,英文名稱Rat anti-double stranded DNA,dsDNA elisa KIT
1、大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)elisa試劑盒 操作方法一用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:(1).包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。 (2).加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。 (3).加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。 (4).加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 (5).終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6).結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
2、大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)elisa試劑盒 操作方法二:用于檢測未知抗體的間接法: (1).用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 (2).加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)(3).于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。 (4).于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘 (5).于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml (6).可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復性好的實驗診斷方法,由于其試劑穩定、易保存、操作簡便、結果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測,既可以做定性試驗也可以做定量分析等優點,已廣泛應用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子等領域。
3、臨床標本的收集和保存 用于ELISA測定的臨床標本最為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前臨床上使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集,要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結果產生影響。如可的松在早晨4~6點之間,會有一峰值出現:生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發性方式釋放,因此,在測定此類激素時,有必要在密切相連的時間間隔內采取數份血樣本,以其中間值為測定值。又如當從臥位變為站立位時,血清中腎素活性將出現明顯增高。再如治療藥物的檢測,應根據藥代動力學選擇服藥后的最適時間抽血檢測。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物和特種蛋白等的檢測的血清標本的收集則沒有時間和體位方面的影響,只是在處理和保存方面要考慮。
(1)要注意避免出現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。(3)血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。(4)冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。(5)標本在保存中如出現細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。
4、試劑準備 在臨床實驗室,對試劑準備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現假陰性。因此在ELISA測定中試劑的準備最為關鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鐘以上后,再進行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應步驟中,能使反應微孔內的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應保證質量。此外,當試劑盒以OPD為底物時,則底物溶液應在反應顯色前臨時配制。
在現在的ELISA商品試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是唯一的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區,易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產生污染。出現氣泡則反應液界面有差異。試劑的加入在國產試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現重復滴加或加在兩孔之間的現象,這樣就會在孔內的非包被區出現非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。
四、溫育溫育是ELISA測定中影響測定成敗最為關鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結合反應在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結合,必須在一定的溫度條件下反應一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。最為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。溫育這一步是臨床ELISA測定中最容易出現問題的步驟。通常目前國內ELISA商品試劑盒的反應溫育時間為37℃ 30分鐘~1小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1~2小時才能有較完全的結合,低于1小時,可能會影響測定下限。因此,關于溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點:要保證在設定的溫度下有足夠的反應時間。一般來說,加完樣本和/或反應試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實驗室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,在做HBsAg測定的室內質控中,測定由衛生部臨床檢驗中心供應的1 ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因為何?這可能就與南方冬天室內溫度較低有關,此時微孔板轉入溫箱后37℃溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。因此,為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內溫度才能達到37℃,從而適當延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是,用一小溫度計放置板孔反應溶液中測量觀察即可。
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L2高速緩存 | 1 MB | 512 KB | |
Bios | AMI PSI 16 Mbit | AMI PSI 16 Mbit | |
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