一抗和二抗的區別:
抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結合。
抗體是能和抗體結合的,即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。
一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當抗原刺激機體產生抗體。也就是說,抗原進入機體刺激機體免疫系統產生免疫應答,由B細胞可以產生與相應抗原發生特異性結合的特殊蛋白質。
一抗二抗都是一種可以特異結合別的物質的基團,而且一抗可以至少結合兩種其他基團(底物和二抗)。
一抗:可以特異結合底物,就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結合與否用肉眼是看不出來的。
二抗:可以和一抗結合,并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發光或顯色基團),作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發光或顯色基團),則不需要二抗。但這樣成本很高,因為一種一抗只識別一種底物。所以如的設計一般是二抗帶上可檢測標記,再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣,當一抗結合到底物上,就可以通過二抗檢測出來。
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產品名稱 | 鋅指蛋白146抗體 |
英文名稱 | ZNF146 |
貨號 | GOY-01K1478 |
別 名;Only zinc finger protein; OZF; OZF_HUMAN; Zfp146; Zinc finger protein 146; Zinc finger protein OZF; ZNF146; MGC125660; MGC125661. 研究域;腫瘤 腫瘤細胞生物標志物 鋅指蛋白 表觀遺傳學 抗體來源;Rabbit 克隆類型;Polyclonal 交叉反應;(predicted: Human, Mouse, Rat, ) 產品應用;ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復) not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user. 理論分子量;33kDa 細胞定位;細胞核 性 狀;Liquid 濃 度;1mg/ml 免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human ZNF146: 121-220/292 亞 型;IgG 純化方法;affinity purified by Protein A 保存條件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. 注意事項;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. Subunit: Binds DNA. Interacts with SUMO conjugating enzyme UBC9/UBE2I. Interacts with the telomeric protein TERF2IP. |
一抗結構:
一抗的選擇要點和技巧:
一、單克隆和多克隆抗體的選擇
由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標明確地與單一的特異抗原決定簇結合,就像導彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種克隆來產生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應中,一般單克隆抗體特異性強,但親和力相對小,檢測抗原靈敏度相對就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強,靈敏度高,但易出現非特異性染色(可以通過封閉等避免)。
二、應用范圍的選擇
有的一抗只能用于 WB ( Western blotting)或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;甚至表明石蠟切片或冰凍切片。購買抗體一定要注意你的需求是什么!
三、種屬反應性的選擇和來源
這一點很重要,表明這種抗體可能存在種屬差異,且這種抗體適合檢測哪種種屬動物體內的抗原。
一般兔來源的多是多克隆;而小鼠來源的多是單克隆,但也有另外。根據此來源來選擇相應的二抗。
二抗的原理及特點:
一、SABC法
原理:SABC法是利用鏈酶親和素(Streptavidin)與生物素(Biotin)特有的高度親和力這一生物學性質,先將生物素與辣根過氧化物酶(HRP)結合,形成生物素化HRP,然后與鏈酶親和素按一定比例混合,形成SABC復合物。用生物素化二抗與抗體結合,再與SABC復合物聯結形成抗原~抗體~生物素化二抗~ SABC復合物。后用底物顯色劑顯色。
特點:該法具有靈敏度高以及低背景染色等特點。
二、SP法
原理:根據生物素(Biotin) 與鏈霉親和素(Streptavidin)具有強結合力的原理設計。在一抗(兔源與鼠源)與相應的靶抗原結合后,生物素化標記的抗多價二抗與一抗特異結合;二抗上標記的生物素與標記了辣根過氧化物酶(HRP)的鏈霉親和素結合,形成抗原~特異性一抗~生物素化的二抗~HRP 標記的鏈霉親和素復合物。
特點:該法孵育時間短(通常為10min),靈敏度高以及低背景染色等特點。
三. Polymer酶標二抗法
原理:該法采用一段多聚氨基酸聚合物作為載體鏈,將該多聚物與二抗結合,然后可再標記上多個HRP/AP酶分子,所以同樣具有很高的信號放大作用。
特點:靈敏度高;操作步驟簡單;無需進行內源性的生物素封閉。
四. 直接酶標二抗法
該法是將HRP/AP酶分子直接標記于二抗上。因此需要普通的酶標二抗即可完成。實驗簡單,成本低,但是因為沒有信號放大作用,所以對很多表達豐度不是很高的抗原就可能檢測不到。
膜粘連蛋白11封閉多肽 | 周期素L抗體 |
環指蛋白207封閉多肽 | 肝糖原磷酸化酶抗體 |
核孔蛋白GLE1封閉多肽 | FITC標記小鼠抗人CD19單克隆抗體 |
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含patatin樣磷脂酶6封閉多肽 | Tafazzin蛋白抗體 |
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關鍵詞:
鋅指蛋白146抗體 ZNF146 1mg/ml
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