適用

北京普華仁生物技術(shù)開發(fā)有限公司（）提供的微囊藻毒素檢測試劑盒適用于水中微囊藻毒素的定量檢測。

檢測原理

微囊藻毒素檢測試劑盒由可以和微囊藻毒素及微囊藻毒素酶標(biāo)記物結(jié)合的多克隆抗體制成。樣品中的微囊藻毒素與微囊藻毒素酶標(biāo)記物競爭結(jié)合數(shù)量有限的抗體結(jié)點(diǎn)。

檢測過程中， 先加入微囊改造毒素酶標(biāo)記物及含有微囊藻毒素的樣品到測試孔中接著加入抗體，酶標(biāo)記物與樣品中的微囊藻毒素競爭結(jié)合同樣的抗體的結(jié)合點(diǎn)。測試孔中包被有抗兔IgG，用于捕獲加入的兔抗微囊藻毒素抗體。

孵育30分鐘后洗掉小孔中所有沒有結(jié)合的分子。每孔中加入干凈的底物溶液，連接的酶結(jié)合物可以將底物轉(zhuǎn)化成藍(lán)色化合物，一個(gè)酶分子可以轉(zhuǎn)化多個(gè)底物分子。

由于各個(gè)孔中抗體可結(jié)合位點(diǎn)是相同的，并且加入的微囊藻毒素酶標(biāo)記物的量也是相同的，樣品中微囊藻毒素含量低的則酶標(biāo)記物結(jié)合得多，顏色會(huì)顯深藍(lán)色。反之，樣品中微囊藻毒素含量高的則酶標(biāo)記物結(jié)合得少，顏色會(huì)顯淺藍(lán)色。

注意：顏色與微囊藻毒素的含量成反比。

較深的顏色=較低的濃度

較淺的顏色=較高的濃度

特性：

特異性

Beacon微囊藻毒素檢測試劑盒沒有區(qū)分微囊藻毒素-LR(作為標(biāo)準(zhǔn)品)及其它類型，然而可以測到微囊藻毒素的其它類型，以下表格中展示的是相關(guān)值及交叉反映率（%CR），以下所有濃度均為ppb級。

試劑盒組成

· 包被有羊抗兔抗體的的微孔板 （12×8條）。

· 陰性對照品一瓶（0ppb微囊藻毒素-LR）。

· 0.1ppb、0.3ppb、0.8ppb、2ppb微囊藻毒素-LR標(biāo)準(zhǔn)品各一瓶。

· 1.0ppb微囊藻毒素質(zhì)控樣品一瓶。

· 微囊藻毒素HRP酶標(biāo)記物一瓶。

· 兔抗微囊藻毒素抗體溶液一瓶。

· 底物一瓶。

· 停止液一瓶。（注意！1N 鹽酸，小心處理）

· 100×清洗液。

注意事項(xiàng)

1. 不用時(shí)請將試劑盒儲存于4-8℃。

2. 不可冷凍試劑盒，不可使其暴露在大于37℃環(huán)境中。

3. 開始實(shí)驗(yàn)前，所有試劑達(dá)到室溫。

4. 不可使用過期試劑。

5. 不同批次的試劑不可混用。

6. 使用確證方法確認(rèn)陽性樣品。

需要的試劑和材料

1. 酶標(biāo)儀

2. 薄膜

3. 計(jì)時(shí)器或表

4. 蒸餾水或去離子水

5. 振蕩器

檢測程序

1. 將所有試劑及樣品置于室溫下。

2. 從鋁箔袋中拿出要求數(shù)量的微孔條，放入干燥劑并重新封好袋子以免微孔條受潮。

3. 稀釋100倍濃縮清洗液為1倍清洗液，例：取5ml 100倍清洗液到500ml洗瓶中并加入495ml蒸餾水。

4. 吸取50ul酶標(biāo)記物到微孔板的每個(gè)孔中。

5. 吸取50ul標(biāo)準(zhǔn)，陰性對照，樣品到對應(yīng)微孔中，必須保證每種溶液使用干凈的吸頭吸取，避免交叉污染。

6. 加入50ul抗體溶液到每個(gè)小孔中。

7. 快速震蕩使孔中的溶液混合，并敷上薄膜，或者微孔板可以放在振蕩器上震蕩孵育，從而達(dá)到在孵育期間持續(xù)震蕩的效果。

8. 孵育30分鐘。

9. 孵育完后，去掉封口膜將微孔中的溶液倒入水槽中，用1倍清洗液清洗完全充滿微孔，震蕩后倒掉，重復(fù)四次，總共五次洗板。在吸水紙上拍打，盡可能將水拍干。

10. 每個(gè)微孔中加入100ul底物溶液。

11. 蓋上小孔并孵育30分鐘。

12. 按照加底物的順序每孔中加入100ul停止液。停止液為1 N鹽酸，需小心操作。

13. 450nm下讀板，如果酶標(biāo)儀有雙波長，可同時(shí)測605或650nm雙波長。

14. 如果酶標(biāo)儀可以處理數(shù)據(jù)，可用半對數(shù)線性或4參數(shù)曲線擬合，如果為手動(dòng)計(jì)算，則可按照以下部分進(jìn)行。

計(jì)算結(jié)果

1. 讀板之后，求標(biāo)準(zhǔn)，陰性對照，樣品的平均吸光度值并按以下方法計(jì)算%B0:

       標(biāo)準(zhǔn)，陰性對照，樣品吸光度值的平均值

%B0 = －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－

陰性對照的平均吸光值

2. 以%B0為Y軸，以微囊藻毒素標(biāo)準(zhǔn)濃度的半對數(shù)值為X軸，繪制曲線。

3. 通過每個(gè)樣品的B0%，在圖上計(jì)算出微囊藻毒素的濃度。

4. 如果樣品B0%在設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)B0%范圍之內(nèi)，就可以得出一個(gè)具體的濃度值。如果樣品B0%出了范圍只能說明樣品的濃度大于高濃度的標(biāo)準(zhǔn)或低于低濃度的標(biāo)準(zhǔn)。

質(zhì)量控制

1． 1.0ppb質(zhì)控樣的%B0值應(yīng)該處于下面的范圍之內(nèi)：

1.0 ppb Microcystin control              0.80-1.30ppb

2． 樣品計(jì)算

 ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~

北京普華仁生物技術(shù)開發(fā)有限公司 

~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~

索取產(chǎn)品詳細(xì)資料，查詢更多其它產(chǎn)品，

請致電：、，

寫郵件至：，

或進(jìn)入我司網(wǎng)站首頁“在線客服”“在線留言”系統(tǒng)，

我們的客服人員會(huì)盡快回復(fù)您。

客服：、、360、

~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~