產品介紹

      本試劑盒系由預包被豬流行性腹瀉病毒（PEDV）抗原的微孔板和酶標記抗原及其他配套試劑組成，應用雙抗原夾心酶聯免疫法（ELISA）原理檢測豬血清、血漿及相關液體樣本中流行性腹瀉病毒抗體。實驗時，在包被板中加入對照血清和待檢樣本，經溫育后，若樣品中含有豬流行性腹瀉病毒抗體，則將與包被板上抗原結合，經洗滌除去未結合的其他成分后；再加入酶標抗原，與包被板上抗原抗體復合物發生特異性結合；再經洗滌除去未結合的酶結合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應形成藍色產物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關；加入終止液終止反應后，產物變為黃色；用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有豬流行性腹瀉病毒抗體。
豬流行性腹瀉病毒抗體檢測試劑盒【儲存及有效期】
于2～8℃避光保存，有效期為6個月。
包被板開封后請于2～8℃避光保存，使用期限為1個月。
【試劑盒組成】 
1. 預包被微孔板條                               96T×1
2. 酶標記物  （紅蓋）                          6ml×1
3. 樣品稀釋液  （藍蓋）                       6ml×1
4. 30X濃縮洗滌液  （透明蓋）               20ml×1
5. 底物液A  （白蓋）                            6ml×1
6. 底物液B  （黑蓋）                            6ml×1
7. 終止液  （黃蓋）                              6ml×1
8. 陽性對照  （紅蓋，已滅活）              0.5 ml×1
9. 陰性對照  （綠蓋，已滅活）              0.5 ml×1
10. 蓋板膜                                            2張
11. 自封袋                                            1個
12. 說明書                                            1份
【樣品制備】
1.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
【洗滌液配制】濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫（25℃左右），并搖動使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作30倍稀釋。
【試驗操作方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。
2.取所需用量包被微孔板條，設空白對照1孔、陰陽性對照各2孔及所需的樣品孔并編好號；未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照50μl；樣品孔每孔加入樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl；空白對照孔不加。
4.混勻，置37℃反應30分鐘。
5.扣去孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。
6.每孔加酶標記物50μl（空白孔除外）。置37℃反應30分鐘。
7.洗滌，同步驟5。
8.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調零，于450nm（630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A450）。測定應在終止后15分鐘內進行。
【結果判定】
1.陰性對照：正常情況下，陰性對照孔平均A值≤0.1；
2.陽性對照：正常情況下，陽性對照孔平均A值≥1.0；
3.臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均A值+0.15；
4.結果判定：樣品A450值大于臨界值，判為陽性；樣品A450值小于臨界值，判為陰性。
【試驗方法的限性】
    該試驗僅作為定性檢測豬流行性腹瀉病毒抗體。

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