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- 庫(kù)存：
5×105
- 供應(yīng)商：
ATCC
- 運(yùn)輸方式：
干冰
- 生長(zhǎng)狀態(tài)：
貼壁生長(zhǎng)
- 規(guī)格：
株
- 須知： 富衡生物發(fā)布1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好？還是冷凍好？ 要冷藏！！因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí)，其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變，溶液往往變堿，某些成分溶解也會(huì)受到影響對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 一年。2.液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用，及使用方法。 幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求，細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì)，在缺少谷氨酰胺時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-20 ?C冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí)，應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺。基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心在其服務(wù)項(xiàng)目中配制分裝了高濃度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支）。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培養(yǎng)基中，其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基。包裝為粉紅色，-24?C保存。 3. 培養(yǎng)用液pH對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響 由于，大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4，偏離此范圍對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不完全相同，原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受差，無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。但總體來(lái)說(shuō)，細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些，偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長(zhǎng)。因此，我們?cè)谂渲婆囵B(yǎng)用液時(shí)，可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。液體在經(jīng)過(guò)0.10um或0.22um濾膜過(guò)濾時(shí)，溶液的pH還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右。4.細(xì)胞傳代消化時(shí)所用胰酶濃度越高越好嗎？ 不見(jiàn)得！因?yàn)橐鹊鞍酌溉芤旱南芰κ呛腿芤旱膒H、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關(guān)。通常情況下，pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力最強(qiáng)。另外，鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進(jìn)行傳代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液反復(fù)沖洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶，以便于將含血清的培養(yǎng)基沖洗干凈，這樣就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液濃度為：（1）０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；（2）０.２５％胰蛋白酶＋０.０３％ＥＤＴＡ。（3）0.25% 胰蛋白酶溶液ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配制。多數(shù)細(xì)胞傳代消化可使用０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ這種消化液。 購(gòu)買(mǎi)上海富衡生物細(xì)胞注意事項(xiàng) （富衡生物）發(fā)布 一、客戶收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。 二、如為貼壁細(xì)胞，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度：1. 未超過(guò)80%匯合度時(shí)，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水，噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；然后打開(kāi)蓋子，先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ml左右，放在離心管里，然后瓶口過(guò)火（嚴(yán)禁直接傾倒），這樣可以保證不污染，再用10ml的移液管，將剩余的培液全部吸出，放于離心管中，培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr（時(shí)間根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況調(diào)整）之后，傳代或者凍存。2. 超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：1） 棄去培養(yǎng)液，用3ml PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次；2） 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)；3） 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中，按要求分瓶。 三、如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。注意：換液時(shí)一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。四、細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？（1）細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；（3）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；（5）視具體情況而定。五、細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；（4）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；（6）視具體情況而定。六、售后服務(wù)政策細(xì)胞污染問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi)，給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果；細(xì)胞活性問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們調(diào)查核實(shí)后予免費(fèi)調(diào)換，不收取任何費(fèi)用。需要客戶提供細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明、細(xì)胞操作處理方法、細(xì)胞質(zhì)量問(wèn)題反饋表;如果搞不清原因的，或者客戶直接愿意支付購(gòu)買(mǎi)價(jià)5.0折的費(fèi)用直接復(fù)蘇。如用戶收到細(xì)胞8-30天之內(nèi)，因處理不當(dāng)造成細(xì)胞死亡或污染，我公司將以5.0折優(yōu)惠價(jià)重新提供一株原細(xì)胞 質(zhì)量可靠，售后有保障 ★ 我?guī)旒?xì)胞近3000種，來(lái)源于美國(guó)ATCC. 細(xì)胞都是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格質(zhì)量控制。 凍存細(xì)胞時(shí)間為5-7個(gè)工作日，活細(xì)胞為7-15個(gè)工作日。 ★ 由于細(xì)胞庫(kù)現(xiàn)有細(xì)胞類目多，為了不出現(xiàn)混亂錯(cuò)誤，需要了解相關(guān)細(xì)胞 價(jià)格及詳細(xì)資料請(qǐng)老師聯(lián)系我們，對(duì)您造成的不便還請(qǐng)見(jiàn)諒！ ★ 注：如運(yùn)輸過(guò)程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡，我們將無(wú)條件補(bǔ)發(fā) 收貨后十個(gè)工作日內(nèi)有其他問(wèn)題提供照片可半價(jià)重發(fā)
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小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株；ben
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