收到如何處理:
1、先,觀察培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯系(所拍照片將作為后續服務依據)。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時,以便穩定細胞狀態。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(所拍照片將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養瓶內培養基,預留5ml左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養,補加培養基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
我司全程提供細胞生物體、生長特性、組織來源、器官、類型、細胞形態、培養條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,我們業您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
C-33 A (人子宮頸癌細胞) | 1×10⁶cells/T25培養瓶 | GOY-01X0045 |
商品介紹 :
名稱C-33 A (人子宮頸癌細胞)
別稱C33A; C33a; C33-A; C-33-A; C-33A; C33
種屬人類
年齡(性別)女性,66歲
組織來源宮頸癌
生長特性貼壁細胞
細胞形態上皮細胞樣
背景描述C-33 A細胞是由N·Auersperg從宮頸癌切片中建立的一系列細胞株中的一株。C-33 A細胞一開始就表現出亞二倍體核型及上皮細胞形態,C-33 A細胞經連續傳代可以觀察到核型不穩定。C-33 A細胞存在成視網膜細胞瘤蛋白(pRB),但大小不正常;C-33 A細胞p53表達上調,且有一個273位密碼子的點突變導致Arg→Cys的替換。
生物安全等1
生長培養基MEM+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例1:3-1:4
推薦換液頻率2~3次/周
倍增時間~32-48小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
實驗材料: 1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞3、50ml離心筒2個 4、滅菌培養皿1個,細胞培養瓶1個 5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 6、細胞計數板1塊; 7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 8、酒精燈1臺;
細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 | 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入 37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移 入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合 均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液, 加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入 含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液 并檢查細胞密度。2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%, 即可進行傳代培養。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
凍存培養基:凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用門配制的完全凍存培養基。1)細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 2)凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。培養細胞凍存方案:以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 1.配制凍存培養基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養基重新懸浮細胞。3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養基需要量。4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。注:離心速度和時間取決于細胞種類。5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態。7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA KitELISA.96T/48T人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA KitELISA.96T/48T人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人系統性紅斑狼瘡(SLE)ELISA KitELISA.96T/48T人系統性紅斑狼瘡(SLE)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抗神經節苷脂抗體(GM1)ELISA KitELISA.96T/48T人抗神經節苷脂抗體(GM1)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA KitELISA.96T/48T人抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA KitELISA.96T/48T人抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抗中性粒細胞抗體(ANA)ELISA KitELISA.96T/48T人抗中性粒細胞抗體(ANA)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)ELISA KitELISA.96T/48T人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抗胰島素受體抗體(AIRA)ELISA KitELISA.96T/48T人抗胰島素受體抗體(AIRA)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抗胃壁細胞抗體(AGPA/PCA)ELISA KitELISA.96T/48T人抗胃壁細胞抗體(AGPA/PCA)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
C-33 A (人子宮頸癌細胞) 兔血漿 Rabbit plasma 0.5ml*10
DNA酶瓊脂 DNase Agar 100
7.5%氯化鈉肉湯 7.5% Sodium Chloride Broth 250g
腸毒素產毒培養基 Enterotoxin toxin-producing medium 250g
亞碲酸鹽肉湯培養基基礎 Sodium Tellurite Broth Base 250g
葡萄球菌增菌肉湯 Staphylococcus Enrichment Broth 250g
甲苯胺藍-DNA酶瓊脂 Toluidine Blue DNAse Agar 100
甘露醇氯化鈉瓊脂培養基(2015藥典) 250g
哥倫比亞CNA瓊脂基礎 Columbia CNA Agar Base 250g
葡萄球菌選擇性瓊脂110 Staphylococcus Selective Agar No.110 250g
關鍵詞:
C-33 A (人子宮頸癌細胞)
上海谷研實業有限公司主要從事免疫學、分子生物學和常規生化試劑的銷售,主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養基、標準溶液產品。銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司產品。
公司客戶遍布大學、研究所、醫院、衛生、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術公司和食品工業等單位。
公司主推品牌: (進口、國產) Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。