我司全程提供細(xì)胞生物體、生長特性、組織來源、器官、類型、細(xì)胞形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說明書信息,我們業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn),讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
C127 [C-127] (小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞) | 1×10⁶cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0043 |
商品介紹 :名稱C127 [C-127] (小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞)
別稱C-127
種屬小鼠
年齡(性別)不詳
組織來源乳房
生長特性貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
背景描述C-127細(xì)胞是源自RⅢ小鼠乳腺癌的未經(jīng)轉(zhuǎn)化的克隆株;C-127細(xì)胞培養(yǎng)上清液沒有逆轉(zhuǎn)錄酶活性。C-127細(xì)胞常用于肉瘤病毒誘導(dǎo)的聚集呈現(xiàn)及牛刺瘤病毒的體外定量測試。近,C-127細(xì)胞常用作牛刺瘤病毒DNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的受體。
生物安全等1
生長培養(yǎng)基DMEM+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例1:3-1:4
推薦換液頻率2~3次/周
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
實(shí)驗(yàn)材料: 1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 2. 100ml滅菌燒杯2個(gè); 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞3、50ml離心筒2個(gè) 4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 | 二.細(xì)胞處理: 1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入 37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移 入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合 均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液, 加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入 含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液 并檢查細(xì)胞密度。2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%, 即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
凍存培養(yǎng)基:凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用門配制的完全凍存培養(yǎng)基。1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。人纖連蛋白(FN)ELISA KitELISA.96T/48T人纖連蛋白(FN)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)ELISA KitELISA.96T/48T人NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA kitELISA.96T/48T人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA KitELISA.96T/48T人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISA KitELISA.96T/48T人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)ELISA KitELISA.96T/48T人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抗突觸膜抗體(PsmAb)ELISA KitELISA.96T/48T人抗突觸膜抗體(PsmAb)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA KitELISA.96T/48T人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)ELISA KitELISA.96T/48T人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA KitELISA.96T/48T人血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
6.5%氯化鈉肉湯 6.5% NaCl Broth 250g
C127 [C-127] (小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞)KEA瓊脂(不含糖) KEA Agar 250g
KEA肉湯 KEA Broth 250g
pH9.6葡萄糖肉湯 pH9.6 Dextrose Broth 250g
改良愛德華瓊脂基礎(chǔ) Edwards Medium,Modified 250g
Todd-Hewitt瓊脂 Todd-Hewitt Agar 250g
液體雙抗增菌液 Liquid Double Anti Bacteria 250g
革蘭氏陽性菌增菌液 Gram Positive Bacteria Enrichment Broth 250g
結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA) VRBG Agar 250g
萬古霉素0.66mg 0.66mg*5
收到如何處理:1、先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
關(guān)鍵詞:
C127 [C-127] (小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞)
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售,主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司產(chǎn)品。
公司客戶遍布大學(xué)、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生、商品檢驗(yàn)檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位。
公司主推品牌: (進(jìn)口、國產(chǎn)) Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。