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產品屬性本產品采購屬于商業貿易行為

諾如病毒GI/GII型和輪狀病毒A組檢測試劑盒(熒光PCR法)說明書

  • 市場價格: 電議
  • 產品型號:
  • 更新時間: 2025/6/13 16:10:22
  • 生產地: 中國大陸
  • 訪問次數: 1062次
  • 公司名稱: 上海谷研實業有限公司

企業檔案

上海谷研實業有限公司

9 營業執照已上傳

企業類型:經銷商

公司地址:嘉定區澄瀏公路52號盛創企業

主營產品:elisa試劑盒/菌種/ATCC細胞/生化試劑/標準品

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產品簡介

諾如病毒GI/GII型和輪狀病毒A組檢測試劑盒(熒光PCR法)說明書的熱銷產品:胱抑素9/半胱氨酸蛋白酶抑制劑9抗體Anti-Smad7 Smad 7抗體
胱抑素S/半胱氨酸蛋白酶抑制劑S抗體Anti-phosphor-SMAD2 (Ser425) 磷酸

詳細內容

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公司簡介


服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱
貨號
規格
諾如病毒GI/GII型和輪狀病毒A組檢測試劑盒(熒光PCR法)說明書
GOY-01P63895
50T
儲存條件:
產品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:
1)Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性好,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄為止定量準確,重現性好的定量方法,已得到全的公認,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多域。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,終酶使底物顯色。常規的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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諾如病毒GI/GII型和輪狀病毒A組檢測試劑盒(熒光PCR法)說明書肉豆蔻基三甲基氯化銨;乳化劑1431;三甲基十四烷基氯化銨;N,N,N-三甲基-1-十四烷氯化物;(1-十四烷基)三甲基氯化銨
 TTAC
其他 Tetradecyltrimethylammonium chloride;N,N,N-Trimethyl-1-tetradecanaminium chloride;Myristyl trimethyl ammonium chloride
產品規格: 超純,99%
包裝:500克
CAS號:4574-04-3
別:Ultra Pure Grade
含量:≥99.0%
PH(5% in DI H2O):6~8
重金屬:≤5ppm
干燥失重:≤0.1%
性狀:結晶粉末
用途:生化研究。用于催化劑,乳化劑,消毒劑,殺菌基,抗靜電劑等
保存:RT

關鍵詞:諾如病毒GI/GII型和輪狀病毒A組檢測試劑盒  熒光PCR法    

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