
服務流程:接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 貨號 | 規格 |
札如病毒檢測試劑盒(熒光PCR法)規格 | GOY-01P63889 | 50T |
儲存條件:
產品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:
1)Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性好,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄為止定量準確,重現性好的定量方法,已得到全的公認,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多域。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,終酶使底物顯色。常規的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
alpha 1腎上腺素能受體B抗體Human HERC4 ELISA Kit小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)免疫試劑盒
根霉屬Bcl2 alpha蛋白抗體Human HINFP ELISA Kit小鼠高密度脂蛋白膽固(HDL-C)免疫試劑盒
Risungbinella白抗原B相關轉錄蛋白5抗體Human HERPUD2 ELISA Kit小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種BTB/POZ結構域蛋白1(型肝炎病的NS5A反轉錄蛋白8)抗體Human HERC5 ELISA Kit小鼠高爾基蛋白73(GP-73)免疫試劑盒
鏈格孢BCL7B蛋白抗體Human HESX1 ELISA Kit小鼠高半胱氨酸(Hcy)免疫試劑盒
灰藍毛霉堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體Human HES5 ELISA Kit小鼠肝脂酶(HL)免疫試劑盒
草假單胞菌B白血病/淋巴瘤蛋白7抗體Human HECTD1 ELISA Kit小鼠肝臟型脂肪酸結合蛋白(L-FABP)免疫試劑盒
異常漢遜酵母異常變種先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體(常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17)Human HEXA ELISA Kit小鼠肝生長因子受體(c-MET/HGFR)免疫試劑盒
黃柄曲霉B遷移基因1抗體Human HECTD2 ELISA Kit小鼠肝生長因子激活物(HGFAC)免疫試劑盒
毛殼(菌)科脊髓小腦共濟失調蛋白BEAN1抗體Human HECTD3 ELISA Kit小鼠肝生長因子(HGF)免疫試劑盒
腫紅皮孔菌B7H6蛋白抗體Human HELT ELISA Kit小鼠甘油三酯(TG)免疫試劑盒
釀酒酵母B特異性轉錄因子抗體Human HELB ELISA Kit小鼠甘油-3-磷酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)免疫試劑盒
梨形卷枝霉橋連整合因子蛋白抗體Human HELLS ELISA Kit小鼠干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)免疫試劑盒
裂孔平伏菌BADH2抗體(水稻)Human HEMGN ELISA Kit小鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒
海洋桿菌丁酰膽堿酯酶單克隆抗體Human HDDC2 ELISA Kit小鼠干擾素調節因子5(IRF5)免疫試劑盒
嗜堿假單胞菌磷酸化β 連環素蛋白抗體Human HDDC3 ELISA Kit小鼠鈣衛蛋白(CALP)免疫試劑盒
針層孔菌Phellinus│sp. 質量規格:>98%,BRγ谷氨酸-半胱氨酸合成酶試劑盒鯊肌
葡座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質量規格:>99%,BCγ干擾素誘導蛋白16/p16試劑盒石杉堿乙
: ATCC23218=CCM2713=CIP107115=DSM43111=IAM14287資源名稱: 達松維爾擬諾卡氏菌達松維爾亞種 質量規格:BRγ干擾素誘導單核因子試劑盒三尖杉堿
札如病毒檢測試劑盒(熒光PCR法)規格乳酪素;酪蛋白;酪朊;酪素;乳酪素;奶酪素;酪膠;酪朊酸
Casein
其他 β-Casein
產品規格: BR,N:14%
包裝: 500克
產品規格: 精制,95%,牛奶提取
包裝: 100克
CAS號:9000-71-9
分子量:大約為57000~375000
別:BR
含量(N計):≥14.0%
水分:≤10.0
可溶物:≤0.5%
比重:1.25~1.31
脂肪:≤0.4%
灼燒殘渣:≤2.0%
別:Purified
蛋白質(干基):≥95.0%
脂肪:≤1.5%
灰份:≤1.8%
酸度:≤45
乳糖:≤1.0%
性狀:微黃色無定性粉末或顆粒。是一種含磷復合蛋白。無臭。無味。有吸濕性。干燥時性質穩定,潮濕時易變壞。溶于堿性水溶液,溶于濃鹽酸呈淺紫色,幾乎不溶于水和非性有機溶劑,當浸入水中則迅速膨脹,但粒子不結合。相對密度1.25~1.31。等電點pI4.7。
用途:生化研究。培養基原材料。是一種輕化工業多用途添加劑,在造紙文教工業上作為粘合劑、增光劑,在皮革工業上用作揩光漿、顏料膏材料,在醫藥上用作水解蛋白材料和醫用手套材料,在印刷工業用作上光劑材料,在家具制造、食品、精密電子、生物塑料和蛋白纖維素、高藝術品等域也有廣泛應用。
保存:RT,保質期3年